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评价AHPND感染的太平洋幼虾的商业功能饮食

马修·A·G·欧文,博士 查尔斯·麦格克博士 Polyana F.Silva,博士 塞萨尔·莫利纳·波维达(Cesar Molina-Poveda)博士

结果显示弧菌减少,存活率提高

功能饮食
研究表明,功能性饮食Lorica可以在体外减少弧菌,提高幼虾的存活率,可以作为抗生素的有效替代品。

可持续的水产养殖发展需要疾病预防策略。在过去的20年中,由于病原体引起的病毒,细菌和真菌疾病,例如白斑病病毒(WSSV),Taura综合征病毒(TSV), 副溶血性弧菌哈维弧菌。了解虾的免疫力,饮食和环境之间的相互作用对于成功实施改善这些病原体影响的策略至关重要。

从大约2009年开始,一种新出现的疾病,称为早期死亡率综合症或EMS-更贴切地称为急性肝胰腺坏死病或AHPND-开始在中国南部造成严重的生产损失。与其他流行性虾病一样,EMS在受灾地区造成严重的生产损失,并影响就业,社会福利和国际市场。

在图1中可以看到AHPND感染虾肝胰腺典型病理的一个例子。

图1:来自的图像 南美白对虾 肝胰腺表现出AHPND病理特征的形态组织变化。 (A)未感染虾的组织形态学,显示正常的肝胰腺(HP)小管,具有不同的R-(吸收性),B-(水泡状),F-(原纤维)和E细胞(胚)。 (B)HP的组织病理学,显示出AHPND的典型病变:HP小管上皮细胞进行性变性,伴随R,B和F细胞的减少,随后E细胞和肾小管间的有丝分裂活性显着降低血细胞浸润(箭头); (C)HP小管上皮细胞的坏死脱落(SL)进入管腔,并被血细胞浸润液包围的HP小管残余物。这最后没有R,B或F细胞,并且一些上皮细胞呈现出突出的核巨肿(核增大)。组织切片用H染色&E.比例尺= 150μm。

实验装置

Skretting水产养殖研究中心(ARC)进行了一系列实验,以研究其功能性饮食Lorica是否可以降低与该疾病有关的死亡率。这些实验包括体外,体内和现场试验。体外筛选候选功能成分的抗细菌活性 副溶血弧菌哈维。确定潜在成分后,在亚利桑那大学水产养殖病理实验室(美国亚利桑那州图森)按照标准协议对单一成分及其组合进行了体内测试。

在使用AHPND引起的攻击之前,一式三份的1克虾缸以对照饮食(不包括功能性成分)或功能性饮食喂养21天 副溶血弧菌。面临的挑战是通过口服饲料,渗透或直接将细菌悬浮液直接添加到装有虾的水箱中来进行。

结果

结果显示,对照组的死亡率为96%,而服用Lorica的功能性成分组的死亡率约为50%。这表示相对百分比生存增加了48%(图2)。请注意,洛瑞卡(Lorica)喂养组的死亡率很高,因此很明显,所有储罐中的所有动物均受到感染,这已通过肝胰腺(HP)的组织学评分得到证实。

图2:生存时间过程 南美白对虾 喂了一种测试食物(Lorica)和对照饮食,并向其挑战 副溶血弧菌 在亚利桑那大学。

为了确认结果是否可重复,在越南的AquaMekong 虾Vet实验室在相似的测试条件下(挑战前21天喂养;对照和功能饮食:每个处理组4个重复罐)进行了独立测试。

这些结果表明,Lorica的平均死亡率在感染后八天达到了46%的峰值,而对照达到了70%的平均死亡率。这表示相对百分比生存增加了34%(图3)。虽然效果不像亚利桑那大学那样大,但是它确实降低了死亡率,并且生存曲线再次显示出一些高原平稳的死亡率,因此我们知道饮食在阻止这种疾病方面是有效的。在该实验中,通过组织学证实感染。这些结果还表明,饲喂洛丽卡的动物在感染后能够迅速恢复。简而言之,洛丽卡不仅可以保护动物,而且可以在感染过程中为它们提供支持。

图3:生存时间过程 南美白对虾 虾以功能性饮食(Lorica)或对照基础饮食喂食, 副溶血弧菌 在AquaMekong 虾Vet Lab。

然后,Skretting ARC确认了适当的喂食方案,即挑战前的喂食时间和最佳喂食频率。由于虾没有免疫记忆,而且饮食既具有抑菌作用,又能减少毒素的产生,这意味着该饮食必须存在于动物体内才能活跃。因此,需要维持每天至少四餐的进食频率,以保持饮食效果。在田间试验中,最佳生长量为每天六餐或更多。因此,我们公司建议每天至少喂饲六次饲料。

厄瓜多尔Skretting的田间试验结果表明,日粮对存活率和池塘生产力具有有益的影响。在生产周期结束时,在集约化系统(每平方米32个)中,Lorica处理和对照之间的存活率差异超过25%。如果以每天每磅的磅数来分析产量(图4),则观察到增幅大于60%,这是由于存活率更高和生长速率更高(图5)。饲喂Lorica的虾群的生长较高,其次是添加其他添加剂的虾,与对照组的差异更大。

图4: 南美白对虾 在厄瓜多尔瓜亚斯省的商业条件下在池塘中饲喂对照饮食或测试(Lorica)饮食(2016年10月)。
图5:池塘的生产力(磅/公顷/天) 南美白对虾 在厄瓜多尔瓜亚斯省的商业条件下在池塘中饲喂对照饮食或测试(Lorica)饮食(2016年10月)。

观点

我们已经在实验室试验和现场试验中证明了功能饮食Lorica的功效。功能成分被证明可以减少 弧菌 在两个独立的研究机构进行体外挑战试验,并在体内激发细菌并提高存活率。现场试验进一步证实了实验室结果,结果表明洛丽卡提高了存活率并最终提高了池塘生产力。 洛丽卡的使用是抗生素使用的有效替代方法,特别是考虑到这些化合物在收获前不需要停药,也不会对培养系统中的病原菌产生抗性。

第一作者提供参考。